优化高效液相色谱法测定鸡肉及鸡汤中嘌呤含量Optimization of High Performance Liquid Chromatography for Detecting Purine Content in Chicken and Chicken Soup
方妍,谢定源,丁璐,余永昊,罗鑫
摘要(Abstract):
从色谱条件的选择和优化混合酸法提取鸡肉和鸡汤中嘌呤两方面,建立了同时检测鸡肉和鸡汤中腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤的高效液相色谱检测方法。结果表明,使用Waters Atlantis dC18(4.6mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为7×10-3 mol/L的KH2PO4-H3PO4(pH为3.8),流速为1.0mL/min,柱温为30℃,紫外检测器检测波长为254nm,进样量为10μL时,4种嘌呤可以完全分开,峰形较好。经方法学验证,4种嘌呤的质量浓度和峰面积在0.5~300mg/L线性范围内,线性关系良好,相关系数R在0.9998~0.9999之间,检出限在0.024~0.129mg/L范围内,检测方法精密度RSD为0.4673%~0.8132%。正交实验优化混合酸提取鸡肉和鸡汤中嘌呤实验结果表明,三氟乙酸浓度为95%,在90℃下水解20min时,鸡肉中总嘌呤的提取效果最好;三氟乙酸浓度为80%,在90℃下水解25min时,鸡汤中总嘌呤的提取效果最好,样品处理重复性RSD在2.202%~7.293%之间,鸡肉样品平均加标回收率在91.6343%~95.9119%之间,鸡汤样品平均加标回收率在93.3189%~96.6424%之间,适用于检测鸡肉和鸡汤中4种嘌呤含量。
关键词(KeyWords): 高效液相色谱;嘌呤;提取;鸡肉;鸡汤
基金项目(Foundation): 国家重点研发计划专项课题(2017YFD0400101);; 中央高校基本科研业务费专项基金资助项目(2017JC013)
作者(Author): 方妍,谢定源,丁璐,余永昊,罗鑫
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