MTT法在酵母菌活菌计数中最佳条件的研究Research on the Optimum Condition of MTT in Yeast Count
龚加路,邓静,吴华昌,邹伟,张静,赵长青,赵兴秀
摘要(Abstract):
为建立一种快速、准确并可以反映酵母菌活性的计数方法。以酵母菌Kazachstania barnettii为研究对象,探究了MTT计数法的最大吸收波长、反应时间、MTT添加量及甲臜是否溶解等影响因素。结果显示:MTT法测定Kazachstania barnettii活菌数的最大吸收波长为500nm,MTT反应量为10μL,反应时间为150min,是否溶解甲臜对测定结果无显著差异(P=0.113>0.05)。在107~109 cfu/mL的菌浓度范围内,MTT计数法与平板计数法呈显著相关性(P=0.998),表明MTT用于酵母菌活菌计数是可行的。
关键词(KeyWords): Kazakhstanis barnettii;活菌计数;MTT
基金项目(Foundation): 四川省教育厅重点项目(15ZA0315);; 自贡市科技局项目(2013ZC10,2013N13);; 四川理工学院人才引进项目(2013RC12,2012RC10);四川理工学院酿酒重点实验室项目(NJ2012-16);四川理工学院校研究生创新基金(y2013008);; 泸州老窖科研奖学金项目(13ljzk05)
作者(Author): 龚加路,邓静,吴华昌,邹伟,张静,赵长青,赵兴秀
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