张崟,熊伟,郭思亚,唐欢,刘玉应,李茜雅,黄伟民

• 1:成都大学肉类加工四川省重点实验室
• 2:西藏药业成都诺迪康生物制药有限公司

摘要(Abstract)：

为了提高鲜味八肽LGAGGSLA发酵菌融合蛋白的酶切得率,对鲜味八肽LGAGGSLA的工程菌进行了工业化发酵,并对表达的融合蛋白中的鲜味肽的酶切工艺采用响应面法进行优化,结果显示:工业化发酵所得融合蛋白与理论预测结果相符;响应面法优化酶切工艺建立的EK酶浓度、酶切时间、酶切温度与酶切率的相关性模型具有较高的可靠性,能很好地反映酶切率与EK酶浓度、酶切时间及酶切温度的相互关系。利用该模型对酶切工艺进行优化,得出EK酶浓度2μL/mL、酶切时间15h、酶解温度24℃时,融合蛋白的酶切率最高,酶切率达93.4%。经HPLC验证,分离纯化后的鲜味八肽与人工合成的鲜味八肽对照品的保留时间基本一致,所得生物源鲜味八肽的纯度高达98%。

关键词(KeyWords)： 鲜味八肽;中试发酵;酶切;纯化

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金(31501505);; 中国博士后科学基金(2017M612969)

作者(Author): 张崟,熊伟,郭思亚,唐欢,刘玉应,李茜雅,黄伟民

参考文献(References)：

• [1]Zhang Y,Venkitasamy C,Pan Z,et al.Novel umami ingredients:umami peptides and their taste[J].Journal of Food Science,2016,82(1):16-22.
• [2]Yamasaki Y,Maekawa K.A peptide with delicious taste[J].Agricultural&Biological Chemistry,1978,42(9):1761-1765.
• [3]Wassenaar P D V,Oord A H A V D,Schaaper W M M.Taste of delicious beefy meaty peptide[J].Journal of Agricultural&Food Chemistry,1995,43(11):2828-2832.
• [4]Masahiro T,Tohru N,Makoto T,et al.The relationship between taste and primary structure of"delicious peptide"(Lys-Gly-Asp-Glu-Glu-Ser-Leu-Ala)from beef soup[J].Agricultural&Biological Chemistry,1989,53(2):319-325.
• [5]Wang K,Maga J A,Bechtel P J.Taste properties and synergisms of beefy meaty peptide[J].Journal of Food Science,2006,61(4):837-839.
• [6]张崟,卢洲,熊伟,等.鲜味八肽的表达载体构建及表达效果验证[J].现代食品科技,2017,33(2):89-93.
• [7]朱晓立,俞巍蔚.30L发酵罐培养枯草芽孢杆菌产高密度芽孢的研究[J].当代化工研究,2016,55(7):54-55.
• [8]Zhang Y,Wei X,Lu Z,et al.Optimization of culturing conditions of recombined Escherichia coli to produce umami octopeptidecontaining protein[J].Food Chemistry,2017,227:78-84.
• [9]张向辉,谭树华,李泰明.肠激酶特点及其基因工程的研究进展[J].药物生物技术,2005,12(5):347-350.