鮰鱼蛋白ACE抑制肽的酶法制备及分离纯化Preparation of ACE Inhibitory Peptide from Longsnout Catfish Protein by Enzymatic Method and Its Separation and Purification
李佳伶,关诗琦,蒋思雨,蔡寅川,郝刚
摘要(Abstract):
以脱脂后的鮰鱼肉为原料,采用分步酶解法制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,通过正交试验优化酶解条件。最佳酶解工艺:调节pH为8,温度为37℃,底物浓度为0.17 g/mL,先加胰蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解1 h后再调节pH为9,温度为55℃,再加入碱性蛋白酶,酶活/底物量为6 U/mg,水解4 h。在此条件下,鮰鱼肉蛋白水解度为12.63%,酶解液ACE抑制率为18.7%。分子量分布分析发现酶解产物分子量主要分布在500 Da以下,占多肽的98.23%。酶解产物经超滤(3 000 Da)分离后ACE抑制率提高至35.4%,再用DA201-C大孔吸附树脂脱盐后ACE抑制率为56.6%,最后用葡聚糖凝胶G-15柱层析进行纯化后得到3个组分,组分G_2的ACE抑制率为66.9%。经过分离纯化后的ACE抑制肽活性相比原酶解液提高了3.6倍。
关键词(KeyWords): 鮰鱼;ACE抑制肽;酶解;分子量分布;分离纯化
基金项目(Foundation): 西南民族大学大学生创新创业项目(S202310656105)
作者(Author): 李佳伶,关诗琦,蒋思雨,蔡寅川,郝刚
参考文献(References):
- [1]黄艳春.酶解淡水鱼蛋白制取血管紧张素转化酶抑制肽的研究[D].武汉:华中农业大学,2004.
- [2]CICOIRA M,ZANOLLA L,ROSSI A.Failure of aldosterone suppression despite angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor administration in chronic heart failure is associated with ACE DD genotype[J].Journal of the American College of Cardiology,2001,37(7):1808-1812.
- [3]吴若晨,吴正浩,冯译萱,等.响应面优化酶促水解鲅鱼蛋白制备ACE抑制肽的研究[J].食品工程,2020(1):28-33.
- [4]尹歆.鲢鱼蛋白制备ACE抑制肽的酶解工艺及其活性研究[D].长沙:湖南农业大学,2012.
- [5]杨贵兰,秦松,王晓艳,等.酶法制备阿拉斯加鳕鱼降压肽的工艺优化及其产物的结构鉴定[J].食品工业科技,2020,41(5):163-168,174.
- [6]黄嘉成,彭喜春.双酶法制备沙丁鱼ACE抑制肽的工艺研究[J].食品工业科技,2015,36(18):295-300,325.
- [7]陶建军.斑点叉尾鮰产业发展情况综述[J].渔业致富指南,2017(13):14-17.
- [8]代云云,袁永明,袁媛,等.中国鮰鱼产业发展现状及趋势分析[J].湖南农业科学,2019(2):89-92.
- [9]中国鮰鱼产业分析报告[J].海洋与渔业,2014(11):25-26.
- [10]赵爽,刘昆仑.食源性ACE抑制肽研究进展[J].粮食与油脂,2017,30(3):37-40.
- [11]吕凯波,朱文婷.双酶分步酶解红花籽粕制备抗氧化肽[J].食品工业,2020,41(10):24-26.
- [12]刘媛,王健,闫凤岐,等.双酶分步酶解制备杏仁蛋白酶解物的工艺[J].食品工业,2019,40(8):142-145.
- [13]欧阳杰,蔡淑君,林蔚,等.多脂红身鱼鱼糜脱脂方法的对比实验研究[J].食品科学,2009,30(24):179-182.
- [14]周慧江,朱振宝,易建华.核桃蛋白水解物水解度测定方法比较[J].粮食与油脂,2012,25(2):28-30.
- [15]王毅梅.草鱼源ACE抑制肽的分离纯化及定量构效研究[D].武汉:武汉工业学院,2011.
- [16]吴悦.酵母来源酪氨酸酶抑制多肽的制备及其活性研究[D].无锡:江南大学,2014.
- [17]姜惠敏.羊胎盘抗氧化肽的制备及其在抗衰老化妆品中的应用[D].无锡:江南大学,2016.
- [18]陈飞平,周家华,曾凡坤,等.苋籽ACE抑制肽的大孔树脂分离纯化[J].食品工业科技,2013,34(11):271-276.
- [19]乔伟,周安国,王之盛,等.小肽促进微量元素吸收的研究进展[J].饲料工业,2006,27(17):12-14.
- [20]刘文颖,林峰,金振涛,等.深海鲑鱼皮来源ACE抑制肽的分离及鉴定[J].现代食品科技,2016,32(6):170-176.
- [21]GU R Z,LIU W Y,LIN F,et al.Antioxidant and angiotensin I-converting enzyme inhibitory properties of oligopeptides derived from black-bone silky fowl (Gallus gallus domesticus Brisson) muscle[J].Food Research International,2012,49(1):326-333.
- [22]陈志伟.超滤技术在蛋白质分离纯化中的应用[J].科技经济导刊,2017(24):106.
- [23]李勇,黄先智,阚建全,等.大孔树脂吸附分离蚕蛹ACE抑制肽的研究[J].食品工业科技,2012,33(16):281-284,288.
- [24]马寒冰,廖永红,徐曼,等.DA201-C大孔吸附树脂纯化大豆多肽条件优化[J].中国调味品,2014,39(9):43-48.