吴长力,陈颖琪,陈桂柳,林梦哲,张宏梅

• 1:广东工业大学生物工程系

摘要(Abstract)：

目的:对植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因(nirS)进行克隆及表达,检测重组酶表达情况及其酶活力。方法:以分离自传统泡菜植物乳杆菌的基因组DNA为模版进行PCR扩增nirS;重组构建TA克隆质粒pMD 19-T-nirS,并转化到大肠杆菌DH5a中保存;通过双酶切消化将nirS基因连接到pET-32a(+)上,获得重组表达质粒pET-32a(+)-nirS,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达;重组酶经纯化后进行SDS-PAGE电泳检测其表达情况;重组酶经复性后检测其酶活力。结果:扩增得到nirS基因并成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,所得重组酶以包涵体形式存在,酶活力为2131.5U/mg。结论:采用基因工程技术获得亚硝酸盐还原酶具有一定的应用前景。

关键词(KeyWords)： 亚硝酸盐还原酶;基因表达;包涵体;植物乳杆菌

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 广东省科技基金(2016A010105021)

作者(Author): 吴长力,陈颖琪,陈桂柳,林梦哲,张宏梅

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