王泽建,刘建镔,万培耀,邢利民,徐欣玥,汪绍杰,梁剑光

• 1:湖州老恒和酿造有限公司
• 2:华东理工大学生物工程学院
• 3:常州大学药学院生物与食品工程学院

摘要(Abstract)：

该研究初步探索了米曲霉在摇瓶条件下发酵产腺苷酸(AMP)脱氨酶的发酵工艺，并对米曲霉产腺苷酸脱氨酶的发酵条件进行了优化。通过单因素(碳源、有机氮源、无机氮源和表面活性剂)实验和正交实验，得到米曲霉在摇瓶条件下产腺苷酸脱氨酶的最佳条件为250 mL的锥形瓶装40 mL培养基，在28℃培养62 h。最优培养基成分含量为麸皮0.4%、蔗糖2.5%、鱼粉2%、(NH_4)_2SO_4 0.075%、吐温-80 0.175%、柠檬酸钠0.2%、MgSO_4 0.03%、ZnSO_4 0.01%、CaCl_2 0.01%、KH_2PO_4 0.02%。在此条件下，酶活可达到205.63 U/mL。

关键词(KeyWords)： 米曲霉;脱氨酶;发酵优化;腺苷酸(AMP)

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 浙江省重点研发计划项目(2020C02056);; 浙江重点农业企业研究院建设项目(2019Y30002)

作者(Author): 王泽建,刘建镔,万培耀,邢利民,徐欣玥,汪绍杰,梁剑光

参考文献(References)：

• [1]HASHIMOTO T,MORISHITA M,IWASHITA K,et al.Production and some properties of salt-tolerant β-xylosidases from a shoyu koji mold.Aspergillus oryzae in solid and liquid cultures[J].Journal of Bioscience and Bioengineering,1999,88(5):479-483.
• [2]姜文侠，石连生，李韬，等.饲用微生态制剂——益生素[J].动物科学与动物医学，2000,17(2):57-59.
• [3]MACHIDA M.Progress of Aspergillus oryzae genomics[J].Advances in Applied Microbiology,2002,51:81-106.
• [4]汤鸣强，郑挺，曾小芳，等.酿造酱油米曲霉产中性蛋白酶提取与酶学性质研究[J].中国调味品，2008(2):38-40,50.
• [5]普为民，丁骅孙，陶元器.5′-腺苷酸脱氨酶生产菌选育及发酵生态学研究[J].云南大学学报，1994,16(2):184-188.
• [6]ASTRID G,DANIEL E.Stabilization of adenylate energy charge by the adenylate deaminase reaction[J].Journal of Biological Chemistry,1973,248(23):8309-8312.
• [7]MARQUETANT R,SABINA R L,HOLMES E W.Identification of a noncatalytic domain in AMP deaminase that influences binding to myosin[J].Biochemistry,1989,28:8744-8749.
• [8]DAVID J,ANUPAM S.AMP deaminase from yeast[J].Journal of Biological Chemistry,1989,264(35):21422-21430.
• [9]段作营，刘军昌，毛忠贵.米曲霉腺苷酸脱氨酶的产酶条件[J].无锡轻工大学学报，2002,21(5):472-476.
• [10]刘军昌，段作营，毛忠贵.AMP脱氨酶活性测定的一种改进方法[J].食品与发酵工业，2001,27(7):30-33.
• [11]叶炜，田吕明，赵劫.响应面法优化米曲霉产AMP脱氨酶的培养基[J].食品科技，2012,37(5):16-20.
• [12]SMILEY K L,BERRY A J,SUELTER C H.An improved purification,crystallization,and some properties of rabbit muscle 5'-adenylic acid deaminase[J].Journal of Biological Chemistry,1967,242(10):2502-2506.
• [13]IKASARI L,MITCHELL D A.Mimicking gas and temperature changes during enzyme production by Rhizopus oligosporus in solid-state fermentation[J].Biotechnology Letters,1998,20:349-353.
• [14]张树政.工业微生物学成就[M].北京：科学出版社，1988:107-110.
• [15]孙小丁，姜守刚，杨丽新.DNS法测定谷氨酸发酵过程中总糖的研究[J].发酵科技通讯，2009,38(3):22-25.
• [16]滑欢欢，扈圆舒，梁亮，等.一种高产谷氨酰胺酶的米曲霉菌种的筛选及应用的研究[J].现代食品，2020(16):32-36.
• [17]孙启星，曾小波，李学伟，等.酱油曲中谷氨酰胺酶酶学特性研究[J].中国调味品，2021,46(4):82-85.
• [18]文永平，肖龙泉，周琳，等.基于肉品调料的甜面酱米曲霉菌种制曲条件与酶活力研究[J].中国调味品，2023,48(6):42-45.
• [19]郭自涛，张梁，李由然，等.重组枯草芽孢杆菌分泌表达腺苷酸脱氨酶[J].食品科学，2015,36(21):135-139.
• [20]许强，张梁，李由然，等.腺苷酸脱氨酶在乳酸克鲁维酵母中构建表达[J].微生物学通报，2016,43(11):2341-2352.
• [21]张齐军.双菌株在酱油制曲中的应用[J].中国调味品，2015,40(2):77-80.
• [22]林祖申.米曲霉制曲过程中酶活性变化及其工艺优化[J].中国酿造，2007(5):56-59.
• [23]LIANG Y,XIE J,ZHANG Q,et al.AGBE:a dual deaminase mediated base editor by fusing CGBE with ABE for creating a saturated mutant population with multiple editing patterns[J].Nucleic Acids Research,2022,50(9):5384-5399.
• [24]NEUGEBAUER M E,HSU A,ARBAB M,et al.Evolution of an adenine base editor into a small,efficient cytosine base editor with low off-target activity[J].Nature Biotechnology,2022,41(5):673-685.
• [25]CHO S I,LEE S,MOK Y G,et al.Targeted A-to-G base editing in human mitochondrial DNA with programmable deaminases[J].Cell,2022,185(10):1764-1776.