产辅酶Q10的米曲霉原生质体制备条件研究Preparation and Regeneration Conditions of Protoplast from Coenzyme Q10 Producing Strain Aspergillus oryzae
李豪,刘燕,谷燕
摘要(Abstract):
为了提高辅酶Q10的产生菌米曲霉菌的基因组改组育种效率,以提高辅酶Q10的产量,本试验对米曲霉原生质体的制备条件进行了研究。通过对影响制备效果的条件,即米曲霉的菌丝菌龄、酶解温度、时间和原生质体稳定剂的浓度四个因素进行全面优化,并利用正交试验确定了原生质体制备的适宜条件:菌龄为12h、原生质体渗透压稳定剂NaCl浓度为0.85mol/L、酶解时间为3.5min、酶解温度为30℃时,米曲霉原生质体制备效果最好,所得原生质体为6.3×106个/mL,再生率达到38.06%。较高的原生质体生成量和再生率为该菌后序的基因组改组研究奠定了基础。
关键词(KeyWords): 米曲霉;原生质体;原生质体制备;原生质体再生;辅酶Q10
基金项目(Foundation): 安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2013B279);; 马鞍山师范高等专科学校精品课程(2011jpkcxl02)
作者(Author): 李豪,刘燕,谷燕
参考文献(References):
- [1]Ingledew W J,Poole R K.The respiratory chains of Escherichia coli[J].Microbiol Rev,1984,48(3):222-271.
- [2]Quinzii C M,Hirano M.Primary and secondary Co Q(10)deficiencies in humans[J].Biofactors,2011,37(5):361-365.
- [3]吴祖芳,翁佩芳,陈坚.辅酶Q10的功能研究进展[J].宁波大学学报(理工版),2001,14(2):85-88.
- [4]陈涛,陈洵,王靖宇,等.DNA及基因组改组在代谢工程中的应用[J].化工学报,2004,55(11):1753-1758.
- [5]李豪.优化米曲霉固体发酵生产辅酶Q10的研究[J].商丘师范学院学报,2014,30(6):51-54.
- [6]张志光.真菌原生质体技术[M].长沙:湖南科学技术出版社,2003.
- [7]Qu Er-jun,Li Chen-xi,Li Wen-jian.Formation conditions of Aspergillius oryzae protoplast[J].Agricultural Basic Science and Method,2010,11(3):9-10.
- [8]Balasubramanian N,Juliet G A,Srikalaivani P,et al.Release and regeneration of protoplasts from the fungus Trichothecium roseum[J].Canadian Journal of Microbiology,2003,49(4):263-268.
- [9]孙剑秋,周东坡.微生物原生质体技术[J].生物学通报,2002,37(7):9-11.